එක් පියවරක් RT-qPCR SYBR හරිත Premix
බළලා අංකය: HCB5140A
එක් පියවරක් RT-qPCR Syber Green Premix යනු SYBR Green I ඩයි මත පදනම් වූ ප්‍රතිදීප්ත ප්‍රමාණකරණය සඳහා ය.ජාන-විශේෂිත ප්‍රයිමර් භාවිතා කරමින්, ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම සහ qPCR ප්රතික්රියා එක් නලයක් තුළ සම්පූර්ණ කර, නැවත නැවත තොප්පිය විවෘත කිරීමේ සහ නල කිරීමේ මෙහෙයුම්වල අවශ්‍යතාවය ඉවත් කරයි, විශ්ලේෂණ කාර්යක්ෂමතාව බෙහෙවින් වැඩි දියුණු කරයි සහ දූෂණය වීමේ අවදානම අඩු කරයි.RNA සාම්පල සඳහා, කට්ටලය කාර්යක්ෂම cDNA සංස්ලේෂණය සඳහා තාප-ප්‍රතිරෝධී ප්‍රතිලෝම ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටේස් සහ ප්‍රමාණාත්මක විස්තාරණය සඳහා HotStart Taq DNA පොලිමරේස් භාවිතා කරයි.ප්‍රශස්ත බෆර පද්ධතිය යටතේ, කට්ටලයේ සංවේදිතාව ඉහළ ප්‍රකාශිත ඉලක්ක සඳහා 0.1 pg තරම් ඉහළ සහ මධ්‍යස්ථව ප්‍රකාශිත ඉලක්ක සඳහා 1 pg තරම් ඉහළ විය හැක.කට්ටලය DNA සාම්පල විස්තාරණය සහ ප්‍රමාණකරණය සඳහා සුදුසු වේ.විවිධ ශාක හා සත්ව සාම්පල, සෛල සහ ක්ෂුද්‍ර ජීවීන්ගෙන් න්‍යෂ්ටික අම්ල සංවේදීව හඳුනා ගැනීමට සහ ප්‍රමාණ කිරීමට එය හැකියාව ලබා දෙයි.
සංරචක
| No | නම | පරිමාව | පරිමාව |
| 1 | උසස් බෆරය | 250 μL | 2×1.25 මිලි |
| 2 | උසස් එන්සයිම මිශ්රණය | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase නිදහස් එච්2O | 250 μL | 2×1.25 මිලි |
ගබඩා කොන්දේසි
මෙම නිෂ්පාදනය වසර 1 ක් සඳහා ආලෝකයෙන් ඈත්ව -25~-15℃ ගබඩා කළ යුතුය.
උපදෙස්
1.ප්රතික්රියා පද්ධති වින්‍යාසයd
| සංරචක | පරිමාව (μL) | පරිමාව (μL) | අවසාන සාන්ද්රණය |
| උසස් බෆරය | 12.5 | 25 | 1× |
| උසස් එන්සයිම මිශ්රණය | 1 | 2 | - |
| Forward Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| ප්‍රතිලෝම ප්‍රයිමර් (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| RNA අච්චුවb | X | X | - |
| RNase නිදහස් එච්2ඕc | 25 දක්වා | 50 දක්වා | - |
සටහන්:
1) a.ටීඔහුගේ අවසාන ප්‍රාථමික සාන්ද්රණය 0.2 μmol/L වූ අතර එය සුදුසු පරිදි 0.1 සහ 1μmol/L අතර සකස් කළ හැක.
2) ආ.ප්‍රතික්‍රියාකාරකය අතිශයින් සංවේදී වන අතර, සම්පූර්ණ RNA 1pg-1μg පරාසයක පවතී, සහ මානව සාම්පල පරීක්ෂා කිරීමේදී 1 pg-100 ng ප්‍රශස්ත ආදානයක් පෙන්නුම් කළ අතර, සුදුසු පරිදි 15-30 පරාසයේ සමස්ත Ct අගයක් පාලනය කරයි.
3) ඇ.ඉලක්කගත ජාන විස්තාරණයේ වලංගුභාවය සහ ප්‍රතිනිෂ්පාදනය සහතික කිරීම සඳහා 20μL හෝ 50μL භාවිතා කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.
4) ඈ.කරුණාකර අතිශය පිරිසිදු බංකුවෙහි සූදානම් වී න්‍යෂ්ටික අපද්‍රව්‍ය රහිත ඉඟි සහ ප්රතික්රියා නල භාවිතා කරන්න;පෙරහන් කාට්රිජ් සමඟ ඉඟි නිර්දේශ කරනු ලැබේ.හරස් දූෂණය සහ aerosol දූෂණයෙන් වළකින්න.
2.ප්රතික්රියා වැඩසටහන
| චක්‍ර පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් |
| ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම | 50℃a | විනාඩි 6 | 1 |
| ආරම්භක denaturation | 95℃ | විනාඩි 5 | 1 |
| විස්තාරණ ප්රතික්රියාව | 95℃ | තත්පර 15 | 40 |
| 60℃b | තත්පර 30 | ||
| දියවන වක්‍ර අදියර | උපකරණ පෙරනිමි | 1 | |
සටහන්:
1) a.පර්යේෂණාත්මක අවශ්‍යතා අනුව ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ උෂ්ණත්වය 50-55°C අතර තෝරාගත හැක.DNA සාම්පල සඳහා, ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ ක්‍රියාවලිය මඟ හැරිය හැක.
2) ආ.විශේෂ අවස්ථා වලදී, ප්‍රාථමික Tm අගය අනුව ඇනීලිං / දිගු උෂ්ණත්වය සකස් කළ හැකිය, 60 ° C නිර්දේශ කෙරේ.
සටහන්
1. මෙම නිෂ්පාදනය පර්යේෂණ භාවිතය සඳහා පමණි.
2. කරුණාකර ඔබේ ආරක්ෂාව සඳහා රසායනාගාර කබා සහ ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම් සමඟ ක්‍රියා කරන්න.
