Multiplex One Step RT-qPCR Premix-UNG
බළලා අංකය: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) යනු අච්චුව ලෙස RNA මත පදනම් වූ මල්ටිප්ලෙක්ස් ප්‍රමාණාත්මක PCR කට්ටලයකි.අත්හදා බැලීමේ ක්‍රියාවලියේදී, ප්රතිලෝම පිටපත් කිරීම සහ ප්‍රමාණාත්මක PCR එකම නලයක් තුළ සිදු කරන ලද අතර එමඟින් පර්යේෂණාත්මක ක්‍රියාකාරිත්වය සරල කළ අතර දූෂණය වීමේ අවදානම අඩු විය.මෙම කට්ටලය තුළ, පළමු කෙඳි cDNA තාප-ප්‍රතිරෝධී ප්රතිලෝම ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටේස් මගින් කාර්යක්ෂමව සංස්ලේෂණය කරන ලද අතර HotStart Tag DNA පොලිමරේස් මගින් ප්‍රමාණාත්මකව විස්තාරණය කරන ලදී.කට්ටලයේ ප්‍රධාන වශයෙන් ප්‍රශස්ත MP බෆරය, එන්සයිම මිශ්රණය ආදිය අඩංගු වේ. බෆර ද්‍රාවණයේ දැනටමත් Mg අඩංගු වේ2+සහ dNTP.මීට අමතරව, විශේෂිත නොවන PCR විස්තාරණය ඵලදායී ලෙස වළක්වන සහ බහු qPCR ප්‍රතික්‍රියා වල විස්තාරණ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි දියුණු කළ හැකි සාධක එකතු කරනු ලැබේ, එමඟින් විස්තාරණ කාර්යක්ෂමතාව සහතික කළ හැකි අතර බහු විස්තාරණ ප්‍රතික්‍රියාවක් දක්වා සිදු කළ හැකිය.aerosol දූෂණය වීමේ අවදානම ඵලදායී ලෙස වැළැක්වීම සඳහා dUTP/UDG පද්ධතිය එකතු කරන ලදී.
සංරචක
1. බෆරය
2. එන්සයිම මිශ්රණය
පිරිවිතර
| උණුසුම් ආරම්භය | බිල්ට් උණුසුම් ආරම්භය |
| හඳුනාගැනීමේ ක්රමය | Primer-probe අනාවරණය |
| PCR ක්රමය | එක් පියවරක් RT-qPCR |
| පොලිමරේස් | Taq DNA පොලිමරේස් |
| නියැදි වර්ගය | DNA |
ගබඩා කොන්දේසි
නිෂ්පාදිතය වියළි අයිස් සමඟ යවන අතර වසර 1 ක් සඳහා -25~-15℃ ගබඩා කළ හැක.එය නිතර වැළකිය යුතුයකැටි කිරීම-දියවීම.වෙන වෙනම ඉතිරි කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.
උපදෙස්
1.ප්රතික්රියාව පද්ධති
| සංරචක | පරිමාව (μL) | අවසාන සාන්ද්රණය |
| 2 × MP බෆරය | 12.5 | 1× |
| එන්සයිම මිශ්රණය | 1 | - |
| ප්‍රයිමර්/ප්‍රොබ් මිශ්රණය (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| සැකිල්ල RNA | 1-10 | - |
| RNase නිදහස් H2O | 25 දක්වා | - |
සටහන්:
භාවිතයට පෙර හොඳින් මිශ්ර කිරීමට වග බලා ගන්න, ප්රචණ්ඩකාරී කම්පනය නිසා ඇතිවන අධික බුබුලු වළක්වා ගන්න.
ඒ.ප්‍රාථමික සාන්ද්රණය: තත්ත්වය අනුව ප්‍රශස්ත ප්‍රාථමික සාන්ද්රණය 0.l සහ 1.0μM අතර බහු ප්‍රයිමර් ඇතුළු ප්‍රයිමර් මිශ්රණය.
බී.පරීක්ෂණ සාන්ද්රණය: තත්ත්වය අනුව ප්‍රශස්ත පරීක්ෂණ සාන්ද්රණය 0.05 සහ 0.5μM අතර ප්‍රශස්ත පරීක්ෂණ සාන්ද්‍රණයක් විය හැකි අතර, ප්‍රතිදීප්ත කන්ඩායමේ බහු ප්‍රොබ් ලේබල් කිරීමේ වෙනස ඇතුළු විමර්ශන මිශ්රණය.
c.සැකිලි තනුක කිරීම: qPCR ඉතා සංවේදී වන අතර අච්චුව තනුක කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.Ct Ct අගය 20 සහ 35 අතර සුදුසු වේ.
ඈපද්ධති සකස් කිරීම: කරුණාකර අතිශය පිරිසිදු වැඩ මේසයේ සහ න්‍යෂ්ටික අපද්‍රව්‍ය නොමැතිව පයිප්පෙටරය සහ ප්‍රතික්‍රියා නළය තුළ සූදානම් කරන්න;පෙරහන් මූලද්රව්යය සමඟ තුවක්කු හිස භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.හරස් දූෂණය සහ aerosol දූෂණයෙන් වළකින්න.
2. ප්‍රශස්ත බයිසිකල් පැදීමප්රොටෝකෝලය
| චක්රය පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් |
| ප්රතිලෝම පිටපත් කිරීම | 50℃ඒ | විනාඩි 20 | 1 |
| මුලික-අඩු කිරීම | 95℃ | විනාඩි 5 | 1 |
| විස්තාරණ ප්රතික්රියාව | 95℃ | තත්පර 15 |
40-45 |
| 60℃ b | තත්පර 30 c |
සටහන්:
ඒ.ප්රතිලෝම පිටපත් කිරීම: උෂ්ණත්වය 42 ° C හෝ 50 ° C තෝරාගත හැක.
බී.විස්තාරණ ප්රතික්රියාව: සැලසුම් කරන ලද ප්‍රයිමර් වල Tm අගය අනුව උෂ්ණත්වය සකස් කරනු ලැබේ.
c.ප්‍රතිදීප්ත සංඥා අත්පත් කර ගැනීම: කරුණාකර උපකරණ අත්පොතෙහි අවශ්‍යතා අනුව පරීක්ෂණ ක්‍රියා පටිපාටිය සකසන්න.
සටහන්
ඔබේ සෞඛ්‍යය සහ ආරක්ෂාව සහතික කිරීම සඳහා කරුණාකර රසායනාගාර කබාය සහ අත්වැසුම් වැනි අවශ්‍ය PPE පැළඳ ගන්න.
