2×HiF Taq සහ Master Mix
බළලා අංකය: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (Dye සමඟ) යනු ප්ලස් HIF DNA පොලිමරේස්, dNTPs සහ ප්රශස්ත බෆරය අඩංගු භාවිතයට සූදානම් 2× පෙර මිශ්ර විසඳුමකි.පොලිමරේස් ක්රියාකාරීත්වය සහ 3′→5′exonuclease ක්රියාකාරකම් වලක්වන කාමර උෂ්ණත්වයේ ඇති monoclonal ප්රතිදේහ දෙකක් පහසුවෙන් සහ ඉතා නිශ්චිත Hot Start PCR සඳහා ප්රධාන මිශ්රණයට එක් කෙරේ.එන්සයිමයට දිගු ඛණ්ඩක විස්තාරණ ධාරිතාවක් ලබා දීම සඳහා ප්රධාන මිශ්රණයට විස්තාරණ සාධකය එකතු කරනු ලැබේ, විස්තාරණයේ දිග 13 kb දක්වා විය හැක, එන්සයිමයට 5′→3′ DNA පොලිමරේස් ක්රියාකාරකම් සහ 3′→5′ ඇත. exonuclease ක්රියාකාරිත්වය, එහි විශ්වාසවන්තභාවය Taq DNA පොලිමරේස් මෙන් 83 ගුණයක් වන අතර එය සාමාන්ය DNA පොලිමරේස් මෙන් 9 ගුණයකි.එය සංකීර්ණ සැකිලි විස්තාරණය කිරීම සඳහා සුදුසු වේ, විස්තාරණ නිෂ්පාදනය මොට අවසානයකි.
2×HIF Taq plus Master Mix (Dye සමඟ) වේගවත් සහ පහසු, ඉහළ සංවේදීතාව, ශක්තිමත් නිශ්චිතභාවය, හොඳ ස්ථාවරත්වය, යනාදී වාසි ඇත, ප්රතික්රියා පද්ධතියට අවශ්ය වන්නේ ප්රාථමික සහ සැකිලි එකතු කිරීම පමණක් වන අතර, එය දෙකකින් විස්තාරණය කළ හැකිය. පියවර ප්රොටෝකෝලය, පර්යේෂණාත්මක පියවර සරල කිරීම සහ කාලය ඉතිරි කිරීම.මෙම නිෂ්පාදනයේ විද්යුත් විච්ඡේදක දර්ශක ඩයි අඩංගු වන අතර PCR නිෂ්පාදන විද්යුත් විච්ඡේදනය සඳහා සෘජුවම භාවිතා කළ හැකිය.මීට අමතරව, නිෂ්පාදනයේ නිශ්චිත ආරක්ෂිත කාරකයක් ද අඩංගු වන අතර එමඟින් ප්රධාන මිශ්රණයට නැවත නැවත කැටි ගැසීමෙන් පසු ස්ථාවර ක්රියාකාරකම් පවත්වා ගත හැකිය.
ගබඩා කොන්දේසි
නිෂ්පාදන වසර 1 ක් සඳහා -25~-15℃ ගබඩා කළ යුතුය.
පිරිවිතර
නිෂ්පාදන පිරිවිතර | මාස්ටර් මික්ස් |
සමාධිය | 2× |
උණුසුම් ආරම්භය | බිල්ට් උණුසුම් ආරම්භය |
උඩින් එල්ලීම | මොට |
ප්රතික්රියා වේගය | වේගවත් |
ප්රමාණය (අවසාන නිෂ්පාදනය) | 13kb දක්වා |
ප්රවාහනය සඳහා කොන්දේසි | වියලි අයිස් |
නිෂ්පාදන වර්ගය | ඉහළ විශ්වාසනීය PCR පූර්ව මිශ්රණ |
උපදෙස්
1.PCR ප්රතික්රියා පද්ධතිය
සංරචක | පරිමාව (μL) |
DNA සැකිල්ල | සුදුසු |
ඉදිරි ප්රාථමිකය (10 μmol/L) | 2.5 |
ප්රතිලෝම ප්රයිමර් (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF Taq සහ Master Mix | 25 |
ddH2O | 50 දක්වා |
2.විවිධ සැකිලි භාවිතා කිරීම නිර්දේශ කෙරේ
සැකිලි වර්ගය | 1kb සිට 10 kb දක්වා කොටස් විස්තාරණය කරන්න |
ජානමය DNA | 50ng-200 ng |
ප්ලාස්මිඩ් හෝ වෛරස් DNA | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (අවසාන PCR ප්රතික්රියා පරිමාවෙන් 10% නොඉක්මවන්න) |
3.විස්තාරණ ප්රොටෝකෝලය
1) ද්වි-පියවර ප්රොටෝකෝලය (සංකීර්ණ අච්චුව)
චක්ර පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් |
ආරම්භක denaturation | 98℃ | මිනිත්තු 3 | 1 |
Denaturation | 98℃ | තත්පර 10 | 30-35 |
දිගු කිරීම | 68℃ | තත්පර 30/kb | |
අවසාන දිගුව | 72℃ | විනාඩි 5 | 1 |
2) තුන්-පියවර ප්රොටෝකෝලය (සාමාන්ය ප්රොටෝකෝලය)
චක්ර පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් |
ආරම්භක denaturation | 98℃ | මිනිත්තු 3 | 1 |
Denaturation | 98℃ | තත්පර 10 | 30-35 |
නිර්වින්දනය | 60℃ | තත්පර 20 | |
දිගු කිරීම | 72℃ | තත්පර 30/kb | |
අවසාන දිගුව | 72℃ | විනාඩි 5 | 1 |
3) Annealing Gradient Protocol (සංකීර්ණ අච්චුව)
චක්ර පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් |
ආරම්භක denaturation | 98℃ | මිනිත්තු 3 | 1 |
Denaturation | 98℃ | තත්පර 10 | 15 (චක්රයකට 1℃ අඩු කිරීම) |
Gradient annealing | 70-55℃ | තත්පර 20 | |
දිගු කිරීම | 72℃ | තත්පර 30/kb | |
Denaturation | 98℃ | තත්පර 10 |
20 |
නිර්වින්දනය | 55℃ | තත්පර 20 | |
දිගු කිරීම | 72℃ | තත්පර 30/kb | |
අවසාන දිගුව | 72℃ | විනාඩි 5 | 1 |
විවිධ විස්තාරණ ප්රොටෝකෝලය යටතේ විශේෂාංග
ප්රොටෝකෝl | ද්වි-පියවර | තුන්-පියවර | Gradient annealing |
පිරිවිතර. | ඉක්මනින් | මධ්යම | මන්දගාමී |
විශේෂත්වය | අධි | මධ්යම | අධි |
PCR අස්වැන්න | මධ්යම | අධි | මධ්යම |
හඳුනාගැනීමේ අනුපාතය | අධි | මධ්යම | අධි |
සටහන්
ඔබේ සෞඛ්යය සහ ආරක්ෂාව සහතික කිරීම සඳහා කරුණාකර අවශ්ය PPE, එවැනි රසායනාගාර කබාය සහ අත්වැසුම් පැළඳ ගන්න!