සාම්පල මුදා හැරීමේ ප්රතික්රියාකාරකය
නියැදි මුදා හැරීමේ ප්රතික්රියාකාරකය අණුක POCT රෝග විනිශ්චය අවස්ථා සඳහා වේ.සෘජු විස්තාරණ LAMP සහ සෘජු විස්තාරණ PCR පද්ධති දෙක සඳහා, න්‍යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණය අවශ්‍ය නොවේ.නියැදියේ බොරතෙල් ලයිසේට් සෘජුවම විස්තාරණය කළ හැකිය, ඉලක්කගත ජානය නිවැරදිව හඳුනාගත හැකිය, නියැදි හඳුනාගැනීමේ කාලය තව දුරටත් කෙටි කළ හැකිය, එය අණුක POCT හි යෙදුම් අවශ්‍යතාවලට හොඳින් ගැලපේ.එය නාසික තුවාල, උගුර සහ අනෙකුත් සාම්පල වර්ග සඳහා සුදුසු වේ.සැකසූ සාම්පල තත්‍ය කාලීන ප්‍රතිදීප්ත ප්‍රමාණාත්මක PCR හෝ LAMP හඳුනාගැනීම සඳහා සෘජුවම භාවිතා කළ හැකි අතර, සංකීර්ණ න්‍යෂ්ටික අම්ල නිස්සාරණ මෙහෙයුම්වලින් තොරව සාම්ප්‍රදායික නිස්සාරණ ක්‍රමවලට සමාන ප්‍රතිඵල ලබා ගත හැක.
ගබඩා කොන්දේසි
කාමර උෂ්ණත්වයේ දී ප්රවාහනය සහ ගබඩා කිරීම.
තත්ත්ව පාලනය
ක්‍රියාකාරී හඳුනාගැනීම - ප්‍රමාණාත්මක qPCR: 800μl නියැදි මුදා හැරීමේ ප්රතික්රියාකාරක පද්ධතිය විස්තාරණය කරන ලදී
Pseudovirus නවකතාව පිටපත් 1000ක් සමඟ, එක් නාසික ස්පුබ් සාම්පලයක්, ප්‍රතිඵලයක් ලෙස සමාන විස්තාරණ වක්‍ර සහ± 0.5 Ct තුළ ΔCt අගයන්.
පර්යේෂණාත්මක ක්රියා පටිපාටියres
1. 800 μl නියැදි මුදා හැරීමේ ප්රතික්රියාකාරකය ගෙන ලයිසිස් ද්‍රාවණය මිලි ලීටර් 1.5 නියැදි නළයකට විහිදුවන්න.
2. swab සමග නාසික තුවාලයක් හෝ උගුර තුවාලයක් ගන්න; නාසික තුවාලවලින් ගන්නා නියැදීම් ක්රියා පටිපාටිය: වඳ swab ගෙන එය නාස්පුඩු තුලට, සෙමින් සෙමින් 1.5 cm පමණ ගැඹුරට ඉදිරියට, මෘදු තත්පර 15 කට වඩා වැඩි කාලයක් නාසික ශ්ලේෂ්මලයට එරෙහිව 4 වරක් කරකවන්න. , පසුව එම swab.Throat swab නියැදීම් පටිපාටිය සමග අනෙකුත් නාසික කුහරය මත එම මෙහෙයුම නැවත නැවත: වඳ තුවාලවලින් ගන්නා සහ මෘදු, ඉක්මනින් pharyngeal tonsils සහ පසුපස pharyngeal බිත්තිය 3 වරක් පිස.
3.නියැදි නලයට වහාම ස්පුබ් එක තබන්න.නියැදි නළය තුළ නියැදිය සම්පූර්ණයෙන්ම ඉවත් කර ඇති බව සහතික කිරීම සඳහා ස්පුබ් හිස අවම වශයෙන් තත්පර 30 ක් ගබඩා ද්‍රාවණය තුළ කරකවා මිශ්‍ර කළ යුතුය.
4. කාමර උෂ්ණත්වයේ දී (20~ 25℃) විනාඩි 1 ක් පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීම, ලිසිස් බෆරය සකස් කිරීම අවසන් වේ.
5. 25μl පද්ධතිය RT-PCR සහ RT-LAMP යන දෙකම හඳුනාගැනීමේ පරීක්ෂණ සඳහා 10μl අච්චු එකතු කිරීම් සමඟ අනුකූල විය.
සටහන්
1. තනි ස්පුබ් එකකට අනුරූප වන නියැදි සෘජු ලයිසේට් අවම ප්‍රමාණය 400μl දක්වා සකස් කළ හැකි අතර, එය පරීක්ෂණ අවශ්‍යතා අනුව සකස් කළ හැක.
2. නියැදි මුදා හැරීමේ ප්රතික්රියාකාරකය මඟින් නියැදිය සැකසූ පසු, හැකි ඉක්මනින් පරීක්‍ෂණයේ ඊළඟ අදියර පැවැත්වීම නිර්දේශ කරනු ලැබේ, විරාම පොරොත්තු කාලය පැය 1කට වඩා අඩු වීම වඩාත් සුදුසුය.
3. සාම්පල ලයිසේට් වල pH අගය ආම්ලික වන අතර, හඳුනාගැනීමේ පද්ධතියට යම් බෆරයක් තිබිය යුතුය.එය pH බෆරය සමඟ බොහෝ PCR, RT-PCR, සහ LAMP ප්‍රතිදීප්ත හඳුනාගැනීම සඳහා සුදුසු වේ, නමුත් බෆරයක් නොමැතිව LAMP වර්ණමිතික හඳුනාගැනීම සඳහා සුදුසු නොවේ.
