රනේස් ඒ
Ribonuclease A (RNaseA) යනු 13.7 kDa පමණ වන අණුක බරක් සහිත ඩයිසල්ෆයිඩ් බන්ධන 4 ක් අඩංගු තනි කෙඳි සහිත පොලිපෙප්ටයිඩයකි.RNase A යනු එන්ඩොරිබොනියුක්ලීස් එකක් වන අතර එය C සහ U අවශේෂවල තනි කෙඳි සහිත RNA නිෂ්ප්‍රභ කරයි.නිශ්චිතවම, නියුක්ලියෝටයිඩයක 5′-රයිබෝස් සහ යාබද පිරමිඩීන් නියුක්ලියෝටයිඩයේ 3′-රයිබෝස් මත ඇති පොස්පේට් කාණ්ඩය මගින් සාදන ලද ෆොස්ෆොඩයිස්ටර් බන්ධනය බෙදීම හඳුනා ගනී, එවිට 2, 3′-චක්‍රීය පොස්පේට් වලට අනුරූප වන ජල විච්ඡේදනය වේ. ′නියුක්ලියෝසයිඩ් පොස්පේට් (උදා pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp සහ A-PG ජනනය කිරීම සඳහා RNase A මගින් බෙදනු ලැබේ).RNase A යනු තනි කෙඳි සහිත RNA බෙදීමේදී වඩාත් ක්‍රියාකාරී වේ.නිර්දේශිත වැඩ කරන සාන්ද්‍රණය 1-100μG/mL, විවිධ ප්‍රතික්‍රියා පද්ධති සමඟ අනුකූල වේ.අඩු ලවණ සාන්ද්‍රණය (0-100 mM NaCl) RNA-DNA දෙමුහුන්කරණය මගින් සාදනු ලබන තනි කෙඳි සහිත RNA, ද්විත්ව නූල් RNA සහ RNA දාම කැපීම සඳහා භාවිතා කළ හැක.කෙසේ වෙතත්, අධික ලවණ සාන්ද්‍රණයකදී (≥0.3 M), RNase A විශේෂිතව තනි කෙඳි සහිත RNA පමණක් වෙන් කරයි.
ප්ලාස්මිඩ් DNA හෝ ප්‍රවේණික DNA සැකසීමේදී RNA ඉවත් කිරීමට RNase A බහුලව භාවිතා වේ. සකස් කිරීමේ ක්‍රියාවලියේදී DNase සක්‍රීය වුවත් නැතත් ප්‍රතික්‍රියාවට පහසුවෙන් බලපෑම් කළ හැක.DNase ක්රියාකාරිත්වය අක්රිය කිරීම සඳහා ජල ස්නානයක තාපාංක කිරීමේ සාම්ප්රදායික ක්රමය භාවිතා කළ හැකිය.මෙම නිෂ්පාදනයේ DNase සහ protease අඩංගු නොවන අතර, භාවිතයට පෙර තාප පිරියම් කිරීම අවශ්ය නොවේ.මීට අමතරව, මෙම නිෂ්පාදනය RNase ආරක්ෂණ විශ්ලේෂණය සහ RNA අනුක්‍රමික විශ්ලේෂණය වැනි අණුක ජීව විද්‍යා පරීක්ෂණ සඳහාද භාවිතා කළ හැක.
ගබඩා කොන්දේසි
නිෂ්පාදිතය -25～-15℃ ගබඩා කළ හැකි අතර, එය වසර 2ක් සඳහා වලංගු වේ.
උපදෙස්
මෙය RNase A ගබඩා විසඳුම සකස් කිරීමේ පොදු ක්‍රමයකි.විසින් ද සකස් කළ හැකරසායනාගාරයේ හෝ විමර්ශන සාහිත්‍යයේ සාම්ප්රදායික ක්‍රමවලට අනුව වෙනත් ක්‍රම (උදාසෘජුවම 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 හෝ Tris-NaCl ද්‍රාවණයක දියවීම)
1. RNase A ගබඩා විසඳුමක් 10 mg/mL සකස් කිරීම සඳහා 10 mM සෝඩියම් ඇසිටේට් (pH 5.2) භාවිතා කරන්න.
2. විනාඩි 15 ක් සඳහා 100 ℃ රත් කිරීම
3. කාමර උෂ්ණත්වයට සිසිල් කරන්න, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) පරිමාව 1/10 එකතු කරන්න, එහි pH අගය 7.4 (සඳහා) සකසන්නඋදාහරණයක් ලෙස, 10g/ml RNase ගබඩා විසඳුම 1M Tris-HCL, PH7.4 500 ml එකතු කරන්න)
4. වසර 2ක් දක්වා ස්ථායී විය හැකි ශීත කළ ගබඩා කිරීම සඳහා -20℃ උප-ඇසුරුම් කර ඇත.
[සටහන්]: උදාසීන තත්ව යටතේ RNaseA ද්‍රාවණය තාපාංක කරන විට, RNase වර්ෂාපතනය ඇතිවේ;එය අඩු pH අගයකින් තම්බා, වර්ෂාපතනයක් තිබේ නම්, එය නිරීක්ෂණය කළ හැකිය, එය ප්රෝටීන් අපද්රව්ය ඇතිවීම නිසා ඇති විය හැක.තාපාංකයෙන් පසු අවසාදිතය හමු වුවහොත්, අධිවේගී කේන්ද්රාපසාරී (13000rpm) මගින් අපද්රව්ය ඉවත් කළ හැකි අතර පසුව ශීත කළ ගබඩා කිරීම සඳහා උප-ඇසුරුම් කළ හැක.
නිෂ්පාදන තොරතුරු
| සමාන පද | Ribonuclease I;අග්න්‍යාශයේ රයිබොනියුක්ලීස්;Ribonuclease 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS අංකය | 9001-99-4 |
| පෙනුම | සුදු lyophilized කුඩු |
| අණුක බර | ~ 13.7kDa (ඇමයිනෝ අම්ල අනුපිළිවෙල) |
| Ph අගය | 7.6 (ක්‍රියාකාරකම් පරාසය 6-10) |
| සුදුසු උෂ්ණත්වය | 60℃ (ක්‍රියාකාරකම් පරාසය 15-70℃) |
| සක්රිය කිරීමේ නියෝජිතයා | Na2+.කේ+ |
| නිෂේධකය | Rnase Inhibitor |
| අක්රිය කිරීමේ ක්රමය | රත් කිරීමෙන් අක්රිය කළ නොහැක, කේන්ද්රාපසාරී තීරුව භාවිතා කිරීමට යෝජනා කෙරේ |
| සම්භවය | ගවයා |
| ද්රාව්යතාව | ජලයේ ද්‍රාව්‍ය (10mg/ml) |
| වියළි මත පාඩු | ≤5.0% |
| එන්සයිම ක්රියාකාරිත්වය | ≥60 Kunitz ඒකක/mg |
| සම විද්‍යුත් ලක්ෂ්‍යය | 9.6 |
සටහන්
ඔබගේ ආරක්ෂාව සහ සෞඛ්‍යය සඳහා, කරුණාකර ක්‍රියා කිරීම සඳහා රසායනාගාර කබා සහ ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම් පළඳින්න.
