UDG/UNG එන්සයිම
UDG(uracil DNA glycosylase) මගින් ssDNA සහ dsDNA වල යූරැසිල් පාදය සහ සීනි-පොස්පේට් කොඳු නාරටිය අතර N-ග්ලයිකොසිඩික් සම්බන්ධකයේ ජල විච්ඡේදනය උත්ප්‍රේරණය කළ හැක.එය පහසුවෙන් aerosol දූෂණය පාලනය කළ හැකි අතර PCR, qPCR, RT-qPCR සහ LAMP වැනි පොදු අණුක ජීව විද්‍යා පද්ධති සඳහා සුදුසු වේ.
පිරිවිතර
| ප්රකාශන සත්කාරක | ප්‍රතිසංයෝජක E. coliwith uracil DNA glycosylase ජානය |
| අණුක බර | 24. 8kDa |
| පිරිසිදුකම | ≥95% (SDS-PAGE) |
| තාප අක්රිය වීම | 95℃, විනාඩි 5-10 |
| ඒකක අර්ථ දැක්වීම | 25℃ දී විනාඩි 30 කින් l μg dU අඩංගු dsDNA ජල විච්ඡේදනය උත්ප්‍රේරණය කිරීමට අවශ්‍ය එන්සයිම ප්‍රමාණය ලෙස එක් ඒකකයක් (U) අර්ථ දැක්වේ. |
ගබඞා
නිෂ්පාදිතය වසර දෙකක් සඳහා -25℃~-15 ° C දී ගබඩා කළ යුතුය.
උපදෙස්
1.පහත ක්‍රමයට අනුව PCR ප්‍රතික්‍රියා මිශ්‍රණය සකස් කිරීම
| සංරචක | පරිමාව (μL) | අවසාන සාන්ද්රණය |
| 10×PCR බෆරය (Mg²+Plus) | 5 | 1× |
| 25 mmol/LMgCl | 3 | 1.5 mmol/L |
| dUTP(10 mmol/L) | 3 | 0.6 mmol/L |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/Leach) | 1 | 0.2 mmol / Leach |
| DNA සැකිල්ල | X | - |
| Primer1 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| ප්‍රයිමර් 2 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Taq DNA පොලිමරේස් (5 U/μL) | 0. 5 | 0. 05 U/μL |
| Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL | 1 | 1 U/μL |
| ddH₂O | 50 දක්වා | - |
සටහන: පර්යේෂණාත්මක අවශ්‍යතා අනුව, dUTP හි අවසාන සාන්ද්රණය 0.2-0.6 mmol/L අතර සකස් කළ හැකි අතර, 0.2 mmol/L dTTP තෝරා බේරා එකතු කළ හැක.
2.විස්තාරණ ක්රියා පටිපාටිය
| චක්‍ර පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් |
| dU අඩංගු සැකිලි පිරිහීම | 25℃ | විනාඩි 10 | 1 |
| UDG සක්‍රිය කිරීම, අච්චුව ආරම්භක denaturation | 95℃ | විනාඩි 5-10 | 1 |
| Denaturation | 95℃ | තත්පර 10 |
30-35 |
| නිර්වින්දනය | 60℃ | තත්පර 20 | |
| දිගු කිරීම | 72℃ | තත්පර 30/kb | |
| අවසාන දිගුව | 72℃ | විනාඩි 5 | 1 |
සටහන: 25°C හි ප්‍රතික්‍රියා කාලය මිනිත්තු 5-10ක් ඇතුළත පර්යේෂණාත්මක අවශ්‍යතා අනුව සකස් කළ හැක.
සටහන්
1.බොහෝ PCR ප්‍රතික්‍රියා බෆරවල UDG ක්‍රියාකාරී වේ.
2.එන්සයිම භාවිතා කරන විට අයිස් පෙට්ටියක හෝ අයිස් ස්නානයක ගබඩා කළ යුතු අතර, භාවිතයෙන් පසු වහාම -20 ° C දී ගබඩා කළ යුතුය.
3.කරුණාකර ඔබේ සෞඛ්‍යය සහ ආරක්ෂාව සහතික කිරීම සඳහා අවශ්‍ය PPE, එවැනි රසායනාගාර කබාය සහ අත්වැසුම් පැළඳ ගන්න!
