Ultra Nuclease GMP-ශ්‍රේණිය
බළලා අංකය: HC2016A
UltraNuclease GMP-ශ්‍රේණිය Escherichia coli (E.coli) හි ප්‍රකාශ කර පවිත්‍ර කරනු ලබන්නේ GMP පරිසරයන් යටතේ ජානමය වශයෙන් නිර්මාණය කර සකස් කර ඇත.විද්‍යාත්මක පර්යේෂණවල දී සෛල සුපර්නැටන්ට් සහ සෛල ලයිසේට් වල දුස්ස්රාවීතාවය අඩු කිරීමට, ප්‍රෝටීන් පිරිසිදු කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි කිරීමට සහ ප්‍රෝටීන් ක්‍රියාකාරී පර්යේෂණ වැඩි දියුණු කිරීමට එයට හැකිය.නිෂ්පාදනයට ධාරක න්‍යෂ්ටික අම්ල අපද්‍රව්‍ය pg-ශ්‍රේණියට අඩු කළ හැකි අතර, වෛරස් පිරිසිදු කිරීම, එන්නත් නිෂ්පාදනය සහ ප්‍රෝටීන්/පොලිසැකරයිඩ ඖෂධ නිෂ්පාදනය ඇතුළු යෙදුම්වල ජීව විද්‍යාත්මක නිෂ්පාදනවල ක්‍රියාකාරීත්වය සහ ආරක්ෂාව වැඩි දියුණු කරයි.මීට අමතරව, සෛල චිකිත්සාව සහ එන්නත් සංවර්ධනය කිරීමේදී මානව පර්යන්ත රුධිර ඒක න්‍යෂ්ටික සෛල (PBMC) ගැටීම වැළැක්වීම සඳහා ද නිෂ්පාදනය යෙදිය හැකිය.
UltraNuclease අවර්ණ විනිවිද පෙනෙන ද්‍රවයක පෙනුම ඇති බෆරයෙන් (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin) ඉවත් කරන ලද විෂබීජහරණය කරන ලද ප්‍රතික්‍රියාකාරක ආකාරයෙන් සපයනු ලැබේ.මෙම නිෂ්පාදනය GMP ක්‍රියාවලි අවශ්‍යතා මගින් නිපදවන අතර ද්‍රව ආකාරයෙන් සපයනු ලැබේ.
සංරචක
UltraNuclease GMP-ශ්‍රේණිය (250 U/μL)
ගබඩා කොන්දේසි
නිෂ්පාදිතය වියළි අයිස් සමඟ නැව්ගත කර ඇති අතර වසර දෙකක් සඳහා -25℃~-15°C ගබඩා කළ හැක.
නිෂ්පාදිතය විවෘත කර සතියකට වඩා වැඩි කාලයක් අංශක 4 ක ගබඩා කර ඇත්නම්, අපි පෙරීම නිර්දේශ කරමුක්ෂුද්ර ජීවී දූෂණය වැළැක්වීම සඳහා නිෂ්පාදනය.
පිරිවිතර
| ප්රකාශන සත්කාරක | UltraNuclease ජානය සමඟ ප්‍රතිසංයෝජක E. coli |
| අණුක බර | 26.5 kDa |
| විද්යුත් ලක්ෂ්යය | 6.85 කි |
| පිරිසිදුකම | ≥99% (SDS-PAGE) |
| ගබඩා බෆරය | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
ඒකක අර්ථ දැක්වීම | එක් ක්‍රියාකාරකම් ඒකකයක නිර්වචනය (U) යනු භාවිතා කරන එන්සයිම ප්‍රමාණයයිΔA260 හි අවශෝෂණ අගය විනාඩි 30 කින් 1.0 කින් වෙනස් කරන්න 2. 625 mL37℃ ප්රතික්රියා පද්ධතිය pH අගය 8.0 (සම්පූර්ණ ජීර්ණයට සමාන වේ37 μg සැමන් ශුක්‍රාණු DNA ඔලිගොනියුක්ලියෝටයිඩ බවට පත් කරයි). |
උපදෙස්
1. නියැදිය එකතු
අනුබද්ධ සෛල: මාධ්‍යය ඉවත් කරන්න, PBS සමඟ සෛල සෝදන්න, සහ අධි ප්‍රවාහය ඉවත් කරන්න.
අත්හිටුවීම සෛල: කේන්ද්රාපසාරී මගින් සෛල එකතු කිරීම, PBS සමඟ සෛල සේදීම, 6,000 දී කේන්ද්රාපසාරීමිනිත්තු 10 ක් සඳහා rpm, පෙති එකතු කරන්න.
Escherichia coli: කේන්ද්රාපසාරී මගින් බැක්ටීරියා එකතු කරන්න, PBS සමඟ වරක් සෝදන්න, 8,000 දී කේන්ද්රාපසාරීමිනිත්තු 5 ක් සඳහා rpm, සහ පෙති එකතු කරන්න.
2. නියැදි ප්රතිකාර
එකතු කරන ලද සෛල පෙති වලට ස්කන්ධ(g) සිට පරිමාව(mL)1:(10-20) අනුපාතයට ලයිසිස් බෆරය සමඟ හෝ අයිස් මත හෝ කාමර උෂ්ණත්වයේ දී යාන්ත්‍රික හෝ රසායනික ක්‍රම මගින් ප්රතිකාර කරන්න (සෛල පෙති ග්‍රෑම් 1ක පමණ අඩංගු වේ.
සෛල 109).
3. එන්සයිම ප්‍රතිකාරය
ප්රතික්රියා පද්ධතියට 1-5mM MgCl එකතු කර pH අගය 8-9 දක්වා සකසන්න.
සෛල පෙති ග්‍රෑම් 1ක් දිරවීමට UltraNuclease ඒකක 250ක අනුපාතයට එකතු කරන්න, විනාඩි 30කට වඩා වැඩි කාලයක් 37℃ උෂ්ණත්වයේ දී ඉන්කියුබ් කරන්න.කරුණාකර තෝරා ගැනීමට "නිර්දේශිත ප්රතික්රියා කාලය" පෝරමය බලන්නප්රතිකාර කාලය.
4. සුපර්නැටන්ට් එකතු
මිනිත්තු 30ක් සඳහා 12,000 rpm දී කේන්ද්රාපසාරී කර අධි ප්‍රවාහය එකතු කරන්න.
සටහන: ද්‍රාවණය ආම්ලික හෝ ක්ෂාරීය නම් හෝ අධික ලුණු, ඩිටර්ජන්ට් හෝ අඩංගු නම්denaturants, කරුණාකර එන්සයිම මාත්‍රාව වැඩි කරන්න හෝ ඒ අනුව ප්රතිකාර කාලය දීර්ඝ කරන්න.
නිර්දේශිත ප්රතික්රියා කොන්දේසිමත
| පරාමිතිය | ප්රශස්ත තත්ත්වය | ඵලදායී කොන්දේසියක් |
| Mg²+ සාන්ද්රණය | 1-5 මි.මී | 1-10 මි.මී |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| උෂ්ණත්වය | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT සාන්ද්රණය | 0-100 මි.මී | >0 මි.මී |
| Mercaptoethanol සාන්ද්රණය | 0-100 මි.මී | >0 මි.මී |
| Monovalent Cation සාන්ද්රණය | 0-20 මි.මී | 0-150 මි.මී |
| පොස්පේට් ලෝන් සාන්ද්රණය | 0-10 මි.මී | 0-100 මි.මී |
නිර්දේශ කර ඇත ප්රතික්රියාව කාලය (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease ප්රමාණය (අවසාන සාන්ද්රණය) | ප්රතික්රියා කාලය |
| 0.25 U/mL | >පැය 10 |
| 2.5 U/mL | >පැ 4 |
| 25 U/mL | විනාඩි 30 |
සටහන්:
කරුණාකර ඔබේ සෞඛ්‍යය සහ ආරක්ෂාව සහතික කිරීම සඳහා අවශ්‍ය PPE, එවැනි රසායනාගාර කබාය සහ අත්වැසුම් පැළඳ ගන්න!
