RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
මෙම නිෂ්පාදනයේ ප්රතික්රියා බෆරය, RT-එන්සයිම මිශ්රණය (Bst DNA පොලිමරේස් සහ තාප ප්‍රතිරෝධී ප්‍රතිලෝම ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටේස්), ලයොෆිලීකරණය කළ ආරක්‍ෂක සහ ක්‍රොමොජනික් ඩයි සංරචක අඩංගු වේ.භාවිතා කිරීමට, බෆරය භාවිතා කරන්න, ප්රතික්රියා එන්සයිම සහ ප්‍රාථමිකය මිශ්‍ර කර අච්චුවට එකතු කරනු ලැබේ;lyophilized ආරක්ෂණය එකතු කිරීම කෙළින්ම විය හැක.එය lyophilizer එකකට සම්බන්ධ කර lyophilized කරන ලද අතර, භාවිතා කරන විට ප්‍රයිමර් සහ සැකිලි පමණක් එකතු කරන ලදී.මෙම කට්ටලය විස්තාරණයේ වේගවත්, පැහැදිලි දෘශ්‍ය හඳුනාගැනීමක් සපයයි, සෘණ ප්‍රතික්‍රියාව රතු පැහැයෙන් සහ ධනාත්මක ප්‍රතික්‍රියාව කහ පැහැයට වෙනස් වීමෙන් පෙන්නුම් කරයි.
සංරචකය
| සංරචකය | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| ලූප-මැදිහත් විස්තාරණ බෆරය (ඩයි සහිත) | 0.96 මිලි | 4.80 mL×2 | 9.60 mL×10 |
| RT-එන්සයිම මිශ්රණය | 270 μL | 2.70 මිලි | 2.70 mL×10 |
| Lyophilized ආරක්ෂණය | 0.96 mL×2 | 9.60 mL×2 | 9.60 mL×20 |
අයදුම්පත්
DNA හෝ RNA සමෝෂ්ණ විස්තාරණය සඳහා.
ගබඩා කොන්දේසි
-25~ -15℃ හි ගබඩා කර ඇති වියළි අයිස් සමඟ ප්‍රවාහනය කෙරේ.නිතර කැටි කිරීම වළක්වන්න, නිෂ්පාදිතය මාස 12 ක් සඳහා වලංගු වේ.
ප්රොටෝකෝලය
1.කාමර උෂ්ණත්වයේ දී භාවිතා කළ යුතු ප්රතික්රියා බෆරය දිය කරන්න.තරයේ මිශ්‍ර කිරීම සඳහා කෙටියෙන් සුලිය හෝ නල ප්‍රතිලෝම කරන්න, ඉන්පසු නළයේ පතුලට දියර එකතු කිරීම සඳහා කේන්ද්‍රාපසාරී කරන්න.
2.ප්රතික්රියා පද්ධතිය සකස් කිරීම.මෙම ප්‍රතික්‍රියාකාරකය ද්‍රව ප්රතික්රියා මිශ්රණය සහ ලයොෆිලීකරණය කළ පද්ධති මිශ්රණය ලෙස ප්රතික්රියා පද්ධති දෙකකින් සකස් කළ හැක.
1) දියර ප්රතික්රියා මිශ්රණය සකස් කරන්න
| සංරචකය | පරිමාව |
| ලූප-මැදිහත් විස්තාරණ බෆරය (ඩයි සහිත) | 10 μL |
| RT-එන්සයිම මිශ්රණය | 2.8 μL |
| 10 × ප්‍රයිමර් මිශ්රණයa | 5 μL |
| DNA/RNA සැකිලි b | × μL |
| න්යෂ්ටික රහිත ජලය | 50 μL දක්වා |
2) Lyophilization පද්ධති මිශ්රණය
① lyophilized මිශ්රණය සකස් කරන්න
| සංරචකය | පරිමාව |
| ලූප-මැදිහත් විස්තාරණ බෆරය (ඩයි සහිත) | 10 μL |
| Lyophilized ආරක්ෂණය | 20 μL |
| RT-එන්සයිම මිශ්රණය | 2.8 μL |
| න්යෂ්ටික රහිත ජලය | 50 μL දක්වා |
② Lyophilization: සකස් කළ මිශ්රණය 50μL පද්ධතියකින් ලයොෆිලීකරණය කරන ලදී
③ ප්රතික්රියා මිශ්රණය සකස් කරන්න
| සංරචකය | පරිමාව |
| Lyophilized මිශ්රණය | 1 කෑල්ලක් |
| 10 × ප්‍රයිමර් මිශ්රණයa | 5 μL |
| DNA/RNA සැකිලි b | × μL |
| න්යෂ්ටික රහිත ජලය | 50 μL දක්වා |
සටහන්:
1) a.10×ප්‍රයිමර් මිශ්රණය : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM ලූප් F/B;
2) ආ.න්යෂ්ටික අම්ල ටෙම්ප්ල් සඳහා DEPC (ජල ද්රාව්ය) නිර්දේශ කරනු ලැබේ.
1.65°C උෂ්ණත්වයේ දී මිනිත්තු 30-45 අතර කාලයක් පුර්වාහන කරන්න, එය වර්ණ වෙනස් කිරීමේ ප්රතික්රියා කාලය අනුව සුදුසු පරිදි දිගු කළ හැක.
2.පියවි ඇසට අනුව කහ ධනාත්මක වූ අතර රතු ඍණ විය.
සටහන්
1.බෆරයේ පතුලේ ලුණු දිස්විය හැකිය, කාමර උෂ්ණත්වයේ දී හොඳින් මිශ්‍ර කිරීම සඳහා කෙටියෙන් සුලිය හෝ නල පෙරළන්න.
2.ප්‍රයිමර් වල තත්වය අනුව ප්රතික්රියා උෂ්ණත්වය 62 ℃ සහ 68 ℃ අතර ප්‍රශස්ත කළ හැක.
3.ඇසුරුම් කරන ලද ප්රතික්රියාකාරක දිගු කාලයක් වාතයට නිරාවරණය නොවිය යුතුය.
4.රතු සහ කහ අවපැහැ ගැන්වීමේ ප්‍රතික්‍රියාව ප්රතික්රියා පද්ධතියේ pH අගය වෙනස් වීම මත රඳා පවතී, කරුණාකර ddH භාවිතා කිරීමට නිර්දේශිත Tris nucleic acid ගබඩා ද්‍රාවණය භාවිතා නොකරන්න.2O ගබඩා කළ න්යෂ්ටික අම්ලය;
5.ප්රතික්රියා පද්ධතිය සකස් කිරීම, ලයොෆිලීකරණය සහ නියැදි සැකසීම සහ නියැදි එකතු කිරීමේ ක්‍රියාවලිය ඇතුළුව අත්හදා බැලීම ප්‍රමිතිගත කළ යුතුය;
6.අපවිත්‍ර වීම වළක්වා ගැනීම සඳහා, ප්රතික්රියා පද්ධතිය අතිශය පිරිසිදු බංකුවක සකස් කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ, වෙනත් වලදී ව්‍යාජ ධනාත්මක මැදිහත්වීම් වළක්වා ගැනීම සඳහා කාමරයේ දුම් ආවරණයට සැකිලි එක් කරන්න.
