එක් පියවරක් වේගවත් RT-qPCR පරීක්ෂණ Premix-UNG
බළලා අංකය: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) යනු සැකිල්ලක් ලෙස RNA භාවිතා කරමින් (RNA වෛරසය වැනි) තනි-plex හෝ multilex ප්‍රමාණාත්මක PCR සඳහා සුදුසු පරීක්ෂණ-පාදක RT-qPCR වේගවත් හඳුනාගැනීමේ කට්ටලයකි.මෙම නිෂ්පාදනය නව පරම්පරාවේ ප්‍රතිදේහ වෙනස් කරන ලද Taq DNA පොලිමරේස් සහ එක්-පියවර කැප වූ ප්‍රතිලෝම ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටේස් භාවිතා කරයි, වේගවත් විස්තාරණය සඳහා ප්‍රශස්ත බෆරයක් සමඟ, වේගවත් විස්තාරණ වේගයක්, ඉහළ විස්තාරණ කාර්යක්ෂමතාවයක් සහ විශේෂත්වයක් ඇත.එය කෙටි කාලයක් තුළ අඩු සහ ඉහළ සාන්ද්‍රණයකින් යුත් සාම්පල තනි-ප්ලෙක්ස් සහ මල්ටිප්ලෙක්ස් යන දෙකෙහිම සමතුලිත විස්තාරණයට සහාය වේ.
සංරචක
1. 5×RT-qPCR බෆරය (U+)
2. එන්සයිම මිශ්‍රණය (U+)
සටහන්:
ඒ.5×RT-qPCR බෆරය (U+) dNTP සහ Mg ඇතුළත් වේ2+;
බී.එන්සයිම මිශ්‍රණයට (U+) ප්‍රතිලෝම ට්‍රාන්ස්ක්‍රිප්ටේස්, Hot Start Taq DNA පොලිමරේස්, RNase inhibitor සහ UDG ඇතුළත් වේ;
c.RNase-Free ඉඟි, EP ටියුබ් ආදිය භාවිතා කරන්න.
භාවිතයට පෙර, 5×RT-qPCR බෆරය (U+) තරයේ මිශ්ර කරන්න.දියවීමෙන් පසු වර්ෂාපතනයක් තිබේ නම්, බෆරය නැවත කාමර උෂ්ණත්වයට පැමිණෙන තෙක් බලා සිටින්න, මිශ්ර කර විසුරුවා හැර, පසුව ඒවා සාමාන්යයෙන් භාවිතා කරන්න.
ගබඩා කොන්දේසි
නිෂ්පාදිතය වියළි අයිස් සමඟ යවන අතර වසර 1 ක් සඳහා -25~-15℃ ගබඩා කළ හැක.
උපදෙස්
1. ප්රතික්රියාව පද්ධති
| සංරචක | පරිමාව (20 μL ප්රතික්රියාව) |
| 2 × RT-qPCR බෆරය | 4μL |
| එන්සයිම මිශ්‍රණය (U+) | 0.8μL |
| Primer Forward | 0.1~ 1.0μM |
| ප්‍රයිමර් ප්‍රතිලෝම | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan පරීක්ෂණය | 0.05 ~ 0.25μM |
| සැකිල්ල | X μL |
| RNase-නිදහස් ජලය | 25μL දක්වා |
සටහන්: ප්‍රතික්‍රියා පරිමාව 10-50μL වේ.
2. පාපැදි ප්රොටෝකෝලය (Standard)
| චක්රය පියවර | උෂ්ණත්වය | කාලය | සයිකල් |
| ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම | 55 ℃ | විනාඩි 10 | 1 |
| ආරම්භක අවප්රමාණය | 95℃ | තත්පර 30 | 1 |
| Denaturation | 95℃ | තත්පර 10 | 45 |
| Annealing/Extension | 60℃ | තත්පර 30 |
| පාපැදි ප්රොටෝකෝලය (ඉක්මනින්) චක්රය පියවර |
උෂ්ණත්වය |
කාලය |
සයිකල් |
| ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීම | 55 ℃ | විනාඩි 5 | 1 |
| ආරම්භක අවප්රමාණය | 95℃ | තත්පර 5 යි | 1 |
| Denaturation | 95℃ | 3 තත් | 43 |
| Annealing/Extension | 60℃ | තත්පර 10 යි |
සටහන්:
ඒ.ප්‍රතිලෝම පිටපත් කිරීමේ උෂ්ණත්වය 50℃ සිට 60℃ අතර වේ, උෂ්ණත්වය වැඩි කිරීම සංකීර්ණ ව්‍යුහයන් සහ ඉහළ CG අන්තර්ගත සැකිලි විස්තාරණය කිරීමට උපකාරී වේ;
බී.ප්‍රයිමරයේ Tm අගය මත පදනම්ව ප්‍රශස්ත නිර්වින්දන උෂ්ණත්වය සකස් කළ යුතු අතර, Real Time PCR උපකරණය මත පදනම්ව ප්‍රතිදීප්ත සංඥා එකතු කිරීම සඳහා කෙටිම කාලය තෝරන්න.
සටහන්
කරුණාකර ඔබේ සෞඛ්‍යය සහ ආරක්ෂාව සහතික කිරීම සඳහා අවශ්‍ය PPE, එවැනි රසායනාගාර කබාය සහ අත්වැසුම් පැළඳ ගන්න!
