අල්ට්රා න්යෂ්ටිය
UltraNuclease යනු Serratia marcescens වලින් ව්‍යුත්පන්න වූ ජානමය වශයෙන් නිර්මාණය කරන ලද endonucleese වන අතර, DNA හෝ RNA, ද්විත්ව හෝ තනි කෙඳි සහිත, රේඛීය හෝ වෘත්තාකාර පුළුල් පරාසයක් යටතේ, න්යෂ්ටික අම්ල 5'-මොනොපොස්පේට් 3-නියුක්ලිනියුක්ලියුක්ලිබයිස් ඔලිගෝනියුක්ලික් අම්ලය බවට සම්පූර්ණයෙන්ම හායනය කිරීමට හැකියාව ඇත. .ජාන ඉංජිනේරුමය වෙනස් කිරීමෙන් පසුව, නිෂ්පාදනය Escherichia coli (E. coli) මගින් පැසවීම, ප්‍රකාශ කිරීම සහ පවිත්‍ර කිරීම සිදු කරන ලදී, එමඟින් සෛල අධිප්‍රවාහක සහ සෛල ලයිසේට් විද්‍යාත්මක පර්යේෂණවල දුස්ස්රාවිතතාවය අඩු කරයි, නමුත් ප්රෝටීන් පිරිසිදු කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව සහ ක්‍රියාකාරී පර්යේෂණ වැඩි දියුණු කරයි.එය ධාරක අපද්‍රව්‍ය න්යෂ්ටික අම්ල ඉවත් කිරීමේ ප්‍රතික්‍රියාකාරකයක් ලෙස ජනක ප්‍රතිකාර, වෛරස් පිරිසිදු කිරීම, එන්නත් නිෂ්පාදනය, ප්රෝටීන් සහ පොලිසැකරයිඩ ඖෂධ කර්මාන්තයේ ද භාවිතා කළ හැකිය.
නිෂ්පාදන විශේෂාංග
| CAS අංකය | 9025-65-4 |
| EC අංකය | |
| අණුක බර | 30kDa |
| සම විද්‍යුත් ලක්ෂ්‍යය | 6.85 කි |
| ප්රෝටීන් සංශුද්ධතාවය | ≥99% (SDS-PAGE සහ SEC-HPLC) |
| විශේෂිත ක්රියාකාරකම් | ≥1.1×106U/mg |
| ප්රශස්ත උෂ්ණත්වය | 37°C |
| ප්රශස්ත pH අගය | 8.0 |
| ප්‍රෝටීස් ක්‍රියාකාරිත්වය | සෘණ |
| Bioburden | ＜10CFU/100,000U |
| අවශේෂ ධාරක සෛල ප්රෝටීන් | ≤10ppm |
| බර ලෝහ | ≤10ppm |
| බැක්ටීරියා එන්ඩොටොක්සින් | 0.25EU/1000U |
| ගබඩා බෆරය | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2, 20mM NaCl, 50% Glycerol |
ගබඩා කොන්දේසි
≤0°C ප්‍රවාහනය；-25~-15°C ආචයනය, වසර 2ක වලංගුභාවය (ශීත කිරීම-දියකිරීමෙන් වළකින්න).
ඒකක අර්ථ දැක්වීම
ඔලිගොනියුක්ලියෝටයිඩවලට කපා දිරවන ලද 37μg සැමන් ශුක්‍රාණු DNA වලට සමාන වන 37 °C, pH 8.0 මිනිත්තු 30ක් ඇතුළත △A260 හි අවශෝෂණ අගය 1.0 කින් වෙනස් කිරීමට භාවිතා කරන එන්සයිම ප්‍රමාණය ක්‍රියාකාරී ඒකකයක් (U) ලෙස අර්ථ දක්වා ඇත.
තත්ත්ව පාලනය
අවශේෂ ධාරක සෛල ප්රෝටීන්: ELISA කට්ටලය
•ප්රෝටේස් අවශේෂ: 250KU/mL UltraNuclease මිනිත්තු 60ක් සඳහා උපස්ථරයක් සමඟ ප්‍රතික්‍රියා කරන ලදී, කිසිදු ක්‍රියාකාරකමක් අනාවරණය නොවීය.
•බැක්ටීරියා එන්ඩොටොක්සින්: LAL-Test, Pharmacopoeia of the People's Republic of China Volume 4 (2020 Edition) gel limit test method.සාමාන්ය රීති (1143).
•ජෛව බර: මහජන චීන සමූහාණ්ඩුවේ Pharmacopoeia වෙළුම 4 (2020 සංස්කරණය)— සාමාන්ය
වඳ පරීක්ෂණය සඳහා රීති (1101), PRC ජාතික සම්මතය, GB 4789.2-2016.
•බර ලෝහ:ICP-AES, HJ776-2015.
මෙහෙයුම්
SDS සාන්ද්‍රණය 0.1% හෝ EDTA ට වඩා වැඩි වූ විට UltraNuclease ක්රියාකාරකම් සැලකිය යුතු ලෙස අවහිර විය.
සාන්ද්‍රණය 1mM ට වැඩි විය.Surfactant Triton X- 100, Tween 20 සහ Tween 80 න්යෂ්ටිය කෙරෙහි බලපෑමක් නැත
සාන්ද්‍රණය 1.5%ට අඩු වූ විට ගුණ.
| මෙහෙයුම් | ප්රශස්ත මෙහෙයුම | වලංගු මෙහෙයුම |
| උෂ්ණත්වය | 37℃ | 0-45℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2+ | 1-2 මි.මී | 1-15 මි.මී |
| DTT | 0- 100 මි.මී | >100මි.මී |
| 2-මර්කැප්ටෝඑතනෝල් | 0- 100 මි.මී | >100මි.මී |
| ඒක සංයුජ ලෝහ අයන (Na+, K+ ආදිය) | 0-20 මි.මී | 0-200මි.මී |
| PO43- | 0- 10 මි.මී | 0- 100 මි.මී |
භාවිතය සහ මාත්රාව
• එන්නත් නිෂ්පාදන වලින් බාහිර නියුක්ලෙයික් අම්ලය ඉවත් කිරීම, අවශේෂ න්යෂ්ටික අම්ල විෂ වීමේ අවදානම අඩු කිරීම සහ නිෂ්පාදන ආරක්ෂාව වැඩි දියුණු කිරීම.
• න්යෂ්ටික අම්ලය නිසා ඇතිවන ආහාර ද්‍රවයේ දුස්ස්රාවීතාවය අඩු කිරීම, සැකසුම් කාලය කෙටි කිරීම සහ ප්රෝටීන් අස්වැන්න වැඩි කිරීම.
• හිතකර අංශු (වෛරසය, ඇතුළත් කිරීමේ ශරීරය, ආදිය) ඔතා ඇති න්යෂ්ටික අම්ලය ඉවත් කරන්න.
අංශුව මුදා හැරීම සහ පිරිසිදු කිරීම සඳහා.
| පර්යේෂණාත්මක වර්ගය | ප්රෝටීන් නිෂ්පාදනය | වෛරස්, එන්නත් | සෛල ඖෂධ |
| සෛල අංකය | 1g සෛල තෙත් බර (මිලි ලීටර් 10 බෆරයක් සමඟ නැවත ලබා දී ඇත) | 1L පැසවීම දියර supernatant | 1L සංස්කෘතිය |
| අවම මාත්රාව | 250U | 100U | 100U |
| නිර්දේශිත මාත්රාව | 2500U | 25000U | 5000U |
• න්යෂ්ටික ප්‍රතිකාර මගින් නියැදියේ විභේදනය සහ ප්‍රතිසාධනය වැඩි දියුණු කළ හැක්කේ තීරු වර්ණදේහ, විද්‍යුත් විච්ඡේදනය සහ බ්ලොටින් විශ්ලේෂණය සඳහා ය.
• ජාන ප්‍රතිකාරයේදී, පිරිසිදු කරන ලද ඇඩිනෝ ආශ්රිත වෛරස් ලබා ගැනීම සඳහා නියුක්ලෙයික් අම්ලය ඉවත් කරනු ලැබේ.
