BsaI සීමා කිරීම් එන්ඩොනියුක්ලීස්
විස්තර
BsaI සීමා කිරීමේ එන්සයිමය යනු E.coli විසින් ප්‍රකාශ කරන ලද Bacillus sphaericus හි BspQI ජානය මගින් කේතනය කරන ලද ප්‍රතිසංයෝජක ප්‍රෝටීනයෙන් ව්‍යුත්පන්න වූ II වර්ගයේ සීමා කිරීමේ එන්ඩොනියුක්ලීස් වේ.සීමා කිරීම් අන්තරාසර්ග ජාන සිතියම්කරණය, ක්ලෝනකරණය සහ අනෙකුත් ක්ෂේත්‍රවල බහුලව භාවිතා වේ.මෙම එන්සයිමය කාර්යක්‍ෂම ජාන රේඛීයකරණය සඳහා ඩීඑන්ඒ ශීඝ්‍රයෙන් කපා දමයි, IIs සීමා කිරීම් එන්ඩොනියුක්ලීස් සීමා කිරීමේ එන්ඩෝනියුක්ලීස්, Bacillus stearothermophilus වෙතින් ක්ලෝන කරන ලද සහ වෙනස් කරන ලද BsaI ජානය රැගෙන යන ප්‍රතිසංයෝජක E. coli වික්‍රියාවකින් ව්‍යුත්පන්න වේ.දේශීය එන්සයිම හා අඩු තරු ක්‍රියාකාරිත්වයට සමාන විශේෂත්වයක් ඇති.එහි හඳුනාගැනීමේ අනුපිළිවෙල සහ බෙදීම් ස්ථාන පහත පරිදි වේ:
5'······GGTCTC(N)······ ··3'
3'······CCAGAG(NNNNN)······5'
රසායනික ව්යුහය
නිෂ්පාදන විශේෂාංග
• සීමා කිරීමේ එන්ඩොනියුක්ලීස් ඉහළ එන්සයිම ක්‍රියාකාරකම් ඇති අතර ආහාර දිරවීමේ ප්‍රතික්‍රියාව ඉක්මනින් සම්පූර්ණ කරයි.
• නිශ්චිත "scalpel" කැපීම සහතික කිරීම සඳහා අඩු විශේෂිත නොවන endonuclease ක්‍රියාකාරකම්.
• BSA පද්ධතියක් නැත, තාප ප්‍රභව දූෂණය අඩු කිරීම.
පිරිවිතර
| පරීක්ෂණ අයිතම | පිරිවිතර |
| එන්සයිම ක්රියාකාරිත්වය | 20 U/µL |
| සංශුද්ධතාවය (SDS-PAGE) | ≥95% |
| Rnase | කිසිවක් අනාවරණය නොවීය |
| විශේෂිත නොවන DNase ක්‍රියාකාරකම් | අනාවරණය කර නැත |
| තරු ක්‍රියාකාරකම් | අනාවරණය කර නැත |
| බැඳීම සහ නැවත කැපීම | ආහාර දිරවීමෙන් පසු DNA කොටස් බන්ධනය කළ හැක.තවද මෙම බන්ධන කොටස් Bsal සමඟ නැවත කපා ගත හැකිය. |
| එන්ඩොටොක්සින් (LAL-පරීක්ෂණ) | ≤10 EU/mg |
| E.Coli DNA | ≤1 පිටපත/2U |
තත්ත්ව පාලනය
සංශුද්ධතාවය ≥ 95%, DNase නැත, RNase ක්‍රියාකාරකම්, ධාරක DNA අපද්‍රව්‍ය ≤ 100pg/mg, ධාරක ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය ≤ -50ppm, එන්ඩොටොක්සින් අපද්‍රව්‍ය ≤ 10EU/mg, ප්‍රෝටීස් ක්‍රියාකාරකම් නැත, වඳ, මයිකොප්ලාස්මා වලින් තොර
අයදුම්පත
Poly (A/T/C/G) අවසානයේ රේඛීය DNA කැබැල්ලක් සකස් කිරීම සඳහා ප්ලාස්මිඩය ජීර්ණය කරන්න;
in vitro පිටපත් කිරීමට පෙර ප්ලාස්මිඩ් අච්චුව රේඛීයකරණය කරන්න;
ආහාර ජීර්ණය සීමා කිරීම;
ඒකක අර්ථ දැක්වීම
එක් ඒකකයක් යනු 50 µL හි සම්පූර්ණ ප්‍රතික්‍රියා පරිමාවක දී 37°C දී පැය 1 කදී අභ්‍යන්තර පාලන DNA 1 µg දිරවීමට අවශ්‍ය එන්සයිම ප්‍රමාණය ලෙස අර්ථ දැක්වේ.
ප්රවාහනය සහ ගබඩා කිරීම
ප්රවාහන:-15 ° C යටතේ නැව්ගත කර ඇත
ගබඞා:-25~-15 ° C දී ගබඩා කරන්න
නිර්දේශිත නැවත පරීක්ෂණ ජීවිතය:වසර 1 යි
