පොස්පේටේස් ක්ෂාරීය (ALP)
විස්තර
ක්ෂාරීය පොස්පේටේස් TAB5 ජානය රැගෙන යන ප්‍රතිසංයෝජක E. coli වික්‍රියාවකින් ව්‍යුත්පන්න වී ඇත.එන්සයිමය DNA සහ RNA ෆොස්ෆොමොනෝස්ටර් වල 5´ සහ 3´ අන්ත වල dephosphorylation උත්ප්‍රේරණය කරයි.එසේම, එය රයිබෝස් මෙන්ම ඩිඔක්සිරයිබොනියුක්ලියෝසයිඩ් ට්‍රයිපොස්පේට් (NTPs සහ dNTPs) ජල විච්ඡේදනය කරයි.TAB5 ක්ෂාරීය පොස්පේටේස් 5' නෙරා ඇති, 5' අවපාත සහ මොට කෙළවර මත ක්‍රියා කරයි.DNA හෝ RNA වල පොස්පරීකරණය කරන ලද අන්ත ඉවත් කිරීම සඳහා ක්ලෝන කිරීම හෝ පරීක්ෂණ අවසන් ලේබල් කිරීම වැනි බොහෝ අණුක ජීව විද්‍යා යෙදුම් සඳහා පොස්පේටේස් භාවිතා කළ හැක.ක්ලෝනකරණ අත්හදා බැලීම් වලදී, dephosphorylation රේඛීය ප්ලාස්මිඩ් DNA ස්වයං-බන්ධනය වීම වළක්වයි.DNA අනුක්‍රමණය සඳහා අච්චුවක් සකස් කිරීම සඳහා PCR ප්‍රතික්‍රියා වල සංස්ථාපිත නොවූ dNTPs පිරිහීමට ද එයට හැකිය.විනාඩි 5ක් 70°C රත් කිරීමෙන් එන්සයිම සම්පූර්ණයෙන් සහ ආපසු හැරවිය නොහැකි ලෙස අක්‍රිය වන අතර එමඟින් බන්ධනය වීමට පෙර පොස්පේටේස් ඉවත් කිරීම හෝ ලේබල් කිරීම අනවශ්‍ය වේ.
භාවිතය
1.ක්ෂාරීය පොස්පේටේස් ප්‍රෝටීන සමඟ සම්බන්ධ වී (ප්‍රතිදේහ, ස්ට්‍රෙප්ටාවිඩින් ආදිය) ඉලක්කගත අණු නිශ්චිතව හඳුනාගත හැකි අතර, ELISA, WB සහ histochemical හඳුනාගැනීමේදී භාවිතා කළ හැක;
2.Alkaline phosphatase ස්වයං-සම්බන්ධ වීම වැළැක්වීම සඳහා DNA හෝ RNA හි 5 '-පර්යන්තය dephosphorize කිරීමට භාවිතා කළ හැක;
3. ඉහත dephosphorylated DNA හෝ RNA රේඩියෝ ලේබල් කරන ලද පොස්පේට් (T4 පොලි-නියුක්ලියෝටයිඩ කයිනේස් හරහා) මගින් ලේබල් කළ හැක.
රසායනික ව්යුහය
පිරිවිතර
| පරීක්ෂණ අයිතම | පිරිවිතර |
| එන්සයිම ක්රියාකාරිත්වය | 5U/μL |
| Endonuclease ක්රියාකාරිත්වය | අනාවරණය නොවිණි |
| Exonuuclease ක්රියාකාරිත්වය | අනාවරණය නොවිණි |
| නිකිං ක්‍රියාකාරකම් | අනාවරණය නොවිණි |
| RNase ක්‍රියාකාරකම් | අනාවරණය නොවිණි |
| E.coli DNA | ≤1පිටපත/5U |
| එන්ඩොටොක්සින් | LAL-ටෙස්ට්, ≤10EU/mg |
| පිරිසිදුකම | ≥95% |
ප්රවාහනය සහ ගබඩා කිරීම
ප්රවාහන:අවට
ගබඞා :2-8 ° C දී ගබඩා කරන්න
නිර්දේශිත නැවත පරීක්ෂාවජීවිතය:අවුරුදු 2 යි
