Multiplex qPCR Probe Premix
බළලා අංකය: HCB5051A
TaqMan මල්ටිප්ලෙක්ස් qPCR Master Mix (Dye Based) යනු 2 × තත්‍ය කාලීන ප්‍රමාණාත්මක PCR විස්තාරණය සඳහා වන පූර්ව විසඳුමකි, එය නිල් පැහැයෙන් යුක්ත වන අතර නියැදි එකතු කිරීමේ බලපෑමක් ඇති ඉහළ සංවේදීතාවකින් සහ නිශ්චිතතාවයකින් සංලක්ෂිත වේ.මෙම නිෂ්පාදනය 2× මිශ්ර පූර්ව මිශ්ර ප්‍රතික්‍රියාකාරකයක් වන අතර එය එක් ප්‍රතික්‍රියාවක හොඳින් ප්‍රතිදීප්ත ප්‍රමාණාත්මක PCR ප්රතික්රියා හතරක් දක්වා සක්‍රීය කරයි.මෙම නිෂ්පාදනයේ උණුසුම්-ආරම්භක Taq එන්සයිම සඳහා ජානමය වශයෙන් වෙනස් කරන ලද ප්‍රතිදේහ ක්රමය අඩංගු වන අතර, විස්තාරණ සංවේදීතාව සහ නිශ්චිතභාවය බෙහෙවින් වැඩි දියුණු කරයි.ඒ අතරම, මෙම නිෂ්පාදනය බහු-ප්රතික්රියා බෆරය ගැඹුරින් ප්‍රශස්ත කර ඇති අතර එමඟින් ප්‍රතික්‍රියාවේ විස්තාරණ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි දියුණු කළ හැකි අතර අඩු සාන්ද්‍රණ සැකිලිවල ඵලදායි විස්තාරණය ප්‍රවර්ධනය කළ හැකිය.මෙම නිෂ්පාදනය ප්‍රවේණිගත කිරීම සහ මල්ටිප්ලෙක්ස් ප්‍රමාණාත්මක විශ්ලේෂණය සඳහා භාවිතා කළ හැක.
පිරිවිතර
| උණුසුම් ආරම්භය | බිල්ට් උණුසුම් ආරම්භය |
| හඳුනාගැනීමේ ක්රමය | Primer-probe අනාවරණය |
| PCR ක්රමය | qPCR |
| පොලිමරේස් | Taq DNA පොලිමරේස් |
| නියැදි වර්ගය | DNA |
ගබඩා කොන්දේසි
නිෂ්පාදිතය වියළි අයිස් සමඟ යවන අතර වසර 2 ක් සඳහා -25~-15℃ ගබඩා කළ හැක.
උපදෙස්
1. ප්රතික්රියාවපද්ධති
| සංරචක | පරිමාව (μL) | අවසාන සාන්ද්රණය |
| 2× TaqMan මල්ටිප්ලෙක්ස් qPCR මාස්ටර් මිශ්‍රණය | 12.5 | 1× |
| ප්‍රාථමික මිශ්‍රණය (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| පරීක්ෂණ මිශ්‍රණය (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| රොක්ස් යොමු සායම් | 0.5 | 1× |
| DNA/cDNA සැකිල්ල | 1-10 | - |
| ddH2O | 25 දක්වා | - |
සටහන්:දැඩි සෙලවීමෙන් අධික බුබුලු වළක්වා ගැනීම සඳහා භාවිතයට පෙර තරයේ මිශ්ර කරන්න.
ඒ.ප්‍රාථමික සාන්ද්රණය: ප්‍රයිමර් මිශ්‍රණයේ ප්‍රයිමර් යුගල කිහිපයක් අඩංගු වේ, සාමාන්‍යයෙන් සෑම ප්‍රයිමරයකම අවසාන සාන්ද්රණය 0.2 μmol/L වන අතර සුදුසු පරිදි 0.1 සහ 0.5 μmol/L අතර සකස් කළ හැක.
බී.පරීක්ෂණ සාන්ද්රණය: ප්‍රොබ් මිශ්‍රණයේ විවිධ ප්‍රතිදීප්ත සංඥා සහිත බහුවිධ පරීක්ෂණ අඩංගු වන අතර, එක් එක් පරීක්ෂණයක සාන්ද්රණය නිශ්චිත තත්ත්වය අනුව 50 සහ 250 nmol/L අතර සකස් කළ හැක.
1.රොක්ස් ඩයි යොමුව: එය ළිං අතර ජනනය වන ප්‍රතිදීප්ත සංඥා දෝෂය නිවැරදි කිරීමට ව්‍යවහාරික ජෛව පද්ධති වැනි තත්‍ය කාලීන PCR විස්තාරණ උපකරණවල භාවිතා වේ;මෙම නිෂ්පාදනයේ Rox ඩයි සඳහන අඩංගු නොවේ.අවශ්‍ය නම් Cas#10200 නිර්දේශ කෙරේ.
2.සැකිලි තනුක කිරීම: qPCR ඉතා සංවේදී වන අතර, භාවිතය සඳහා අච්චුව තනුක කිරීම නිර්දේශ කෙරේ.අච්චුව cDNA තොග විසඳුමක් නම්, අච්චු පරිමාව මුළු පරිමාවෙන් 1/10 නොඉක්මවිය යුතුය.
3.ප්රතික්රියා පද්ධතිය: ඉලක්කගත ජාන වර්ධකයේ සඵලතාවය සහ පුනරාවර්තනය සහතික කිරීම සඳහා 25μL,30μL හෝ 50 μL නිර්දේශ කෙරේ.
4.පද්ධති සකස් කිරීම: කරුණාකර සුපිරි පිරිසිදු බංකුවෙහි සූදානම් කර, න්‍යෂ්ටික අපද්‍රව්‍ය නොමැතිව ඉඟි සහ ප්රතික්රියා නල භාවිතා කරන්න;පෙරහන් කාට්රිජ් සමඟ ඉඟි භාවිතා කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.හරස් දූෂණය සහ aerosol දූෂණයෙන් වළකින්න.
2.ප්රතික්රියා වැඩසටහන
| චක්‍ර පියවර | උෂ්ණත්වය. | කාලය | සයිකල් |
| මුලික-අඩු කිරීම | 95℃ | විනාඩි 5 | 1 |
| Denaturation | 95℃ | තත්පර 15 | 45 |
| Annealing/Extension | 60℃ | තත්පර 30 |
සටහන්:
1.Annealing/Extension: සැලසුම් කරන ලද ප්‍රාථමික Tm අගයට අනුව උෂ්ණත්වය සහ වේලාව සුදුසු පරිදි සකස් කළ හැක.
2.ප්‍රතිදීප්ත සංඥා අත්පත් කර ගැනීම: විවිධ qPCR හඳුනාගැනීමේ උපකරණ සඳහා අවශ්‍ය ප්‍රතිදීප්ත සංඥා ලබා ගැනීමේ කාලය වෙනස් වේ, කරුණාකර අවම කාල සීමාව අනුව සකසන්න.පොදු උපකරණ කිහිපයක කාලය පහත පරිදි සකසා ඇත:
තත්පර 20: ව්‍යවහාරික ජෛව පද්ධති 7700, 7900HT, 7500 වේගවත්
තත්පර 31: ව්‍යවහාරික ජෛව පද්ධති 7300
තත්පර 32: ව්‍යවහාරික ජෛව පද්ධති 7500
සටහන්
කරුණාකර ඔබේ සෞඛ්‍යය සහ ආරක්ෂාව සහතික කිරීම සඳහා අවශ්‍ය PPE, එවැනි රසායනාගාර කබාය සහ අත්වැසුම් පැළඳ ගන්න!
