2×PCR සුපිරි මිශ්‍රණය (ඩයි සහිත)
2× PCR Master Mix හි Taq DNA Polymerase, dNTPs සහ අනෙකුත් PCR-අවශ්‍ය සංරචක අඩංගු වේ.අපගේ අභිරුචිකරණය කරන ලද ස්ථායීකාරක සමඟ 4℃ හි මාස 3ක් සඳහා Master Mix ස්ථායී වේ.පෙර මිශ්‍ර විසඳුම සාම්ප්‍රදායික PCR සඳහා ප්‍රශස්ත කර ඇති අතර DNA අච්චුව සහ ප්‍රයිමර් එකතු කිරීමෙන් භාවිතයට සූදානම්ය.PCR නිෂ්පාදන පූර්ව පටවන ලද බ්‍රොමොෆෙනෝල් නිල් සායම් සමඟ විද්‍යුත් විච්ඡේදනය සඳහා සෘජුවම පැටවිය හැක.විස්තාරණය කරන ලද නිෂ්පාදනවල 3 '-dA නෙරායාම අඩංගු වන අතර පහසුවෙන් T දෛශිකයට ක්ලෝන කළ හැක.2×PCR මාස්ටර් මිශ්‍රණය PCR ක්‍රියා පටිපාටිය සරල කරන අතර දූෂණය අඩු කරයි.
ගබඩා කොන්දේසි
නිෂ්පාදන වසර 2 ක් සඳහා -25℃~-15℃ ගබඩා කළ යුතුය.
පිරිවිතර
| විශ්වාසවන්තභාවය (එදිරිව Taq) | 1× |
| උණුසුම් ආරම්භය | No |
| උඩින් එල්ලීම | 3 '-ඒ |
| පොලිමරේස් | Taq DNA පොලිමරේස් |
| ප්රතික්රියා ආකෘතිය | SuperMix හෝ Master Mix |
| ප්රතික්රියා වේගය | සම්මත |
| නිෂ්පාදන වර්ගය | PCR Master Mix (2x) |
උපදෙස්
1.ප්රතික්රියා පද්ධතිය
| සංරචක | පරිමාව(μL) |
| DNA සැකිල්ල | සුදුසු |
| ප්‍රාථමික 1 (10 μmol/L) | 2 |
| ප්‍රයිමර් 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2× PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50 දක්වා |
2.විස්තාරණ ප්රොටෝකෝලය
| චක්‍ර පියවර | උෂ්ණත්වය (°C) | කාලය | සයිකල් |
| ආරම්භක denaturation | 94 | විනාඩි 5 | 1 |
| Denaturation | 94 | තත්පර 30 | 35 |
| නිර්වින්දනය | 50-60 | තත්පර 30 | |
| දිගු කිරීම | 72 | තත්පර 30-60/kb | |
| අවසාන දිගුව | 72 | විනාඩි 10 | 1 |
සටහන:
1) සැකිලි භාවිතය: 50-200ng ජානමය DNA;0.1-10ng ප්ලාස්මිඩ් DNA.
2) එම්.ජී2+සාන්ද්‍රණය: මෙම නිෂ්පාදනයේ බොහෝ PCR ප්රතික්රියා සඳහා සුදුසු MgCl2 3mM අඩංගු වේ.
3) Annealing උෂ්ණත්වය: කරුණාකර ප්‍රයිමර් වල න්‍යායික Tm අගය බලන්න.ප්‍රාථමිකයේ න්‍යායික අගයට වඩා 2-5℃ දක්වා අඩුවෙන් නිර්වින්දන උෂ්ණත්වය සැකසිය හැක.
4) දිගු කිරීමේ කාලය: අණු හඳුනා ගැනීම සඳහා, තත්පර 30/kb නිර්දේශ කෙරේ.ජාන ක්ලෝනකරණය සඳහා තත්පර 60/kb නිර්දේශ කෙරේ.
සටහන්
1.2× PCR Master Mix සහිත PCR නිෂ්පාදන polyacrylamide gel electrophoresis සඳහා සුදුසු නොවේ.
2.ඔබගේ ආරක්ෂාව සහ සෞඛ්‍යය සඳහා, කරුණාකර ක්‍රියා කිරීම සඳහා රසායනාගාර කබා සහ ඉවත දැමිය හැකි අත්වැසුම් පළඳින්න.
3.එය පර්යේෂණ භාවිතය සඳහා පමණක් භාවිතා වේ!
